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相對定量SYBR Green I 染料法
作者:admin    發(fā)表時間:2015-04-13

相對定量SYBR Green I 染料法

  相對定量 (mRNA表達量分析):基因表達的研究一般采用相對定量的方法。相對定量法必須對樣品的目的基因和內(nèi)參基因同時分別進行定量,然后求出對于內(nèi)參基因的目的基因的相對量。通過對樣品間的目的基因的相對量進行比較,可以對不同樣品間的mRNA進行表達量分析。內(nèi)參基因通常選用表達量相對恒定的Housekeeping Gene,如:GAPDH、β-actin等。通過同時對內(nèi)參基因的實時檢測,可以對樣品之間由于起始細胞數(shù)不同、或RNA提取效率的不同等造成的RNA量誤差進行校正,達到在嚴(yán)格意義上對樣品之間的mRNA表達量進行分析之目的。
  SYBR Green I 是一種與雙鏈DNA小溝結(jié)合的熒光染料,SYBR Green I只與雙鏈DNA結(jié)合才能發(fā)出熒光,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,熒光信號與雙鏈DNA分子數(shù)成正比,隨著擴增產(chǎn)物增加而增加,熒光信號的強度代表了反應(yīng)體系中雙鏈DNA分子的數(shù)量。

服務(wù)價格

服務(wù)編號

服務(wù)內(nèi)容

價格

周期

CWS019

每基因≤10樣品

¥2980/整個服務(wù)

3-4周

CWS020

每基因10-20樣品

¥278/樣品?基因

4-5周

CWS021

每基因>20樣品

¥258/樣品?基因

4-5周

 

服務(wù)內(nèi)容
  以熒光定量PCR方法對樣本基因表達進行相對定量。

實驗流程
  1.RNA/DNA提取。
  2.將RNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。
  3.隨機選擇一個樣品進行預(yù)實驗,篩選引物,優(yōu)化程序。
  4.熒光定量PCR正式試驗。
  5.提交報告,原始Ct值。

服務(wù)優(yōu)勢
  ·先進的儀器,優(yōu)質(zhì)的試劑,專業(yè)的團隊,實驗結(jié)果更可靠。
  ·免費設(shè)計優(yōu)化引物,使定量PCR反應(yīng)擴增效率達到90%以上,使相對定量結(jié)果更可靠。

樣品要求
  客戶需提供組織、細胞、血液等樣品材料,或純化好的總RNA或總DNA,反轉(zhuǎn)錄好的cDNA樣品,具體要求如下:

材料種類

樣品要求

起始量

血液

新鮮血液及抗凝劑處理的全血

1ml

培養(yǎng)細胞

離心收集的細胞

1x107

動物組織

一般材料

100mg

植物

一般材料

100mg

RNA OD260/OD280在1.9-2.1之間,完整性好 >1ug
DNA OD260/OD280在1.7-1.9之間,完整性好 >1ug
cDNA 內(nèi)參基因檢測成功 >20ul


終產(chǎn)品
  ·目的基因剩余引物 (上游引物和下游引物,合成量≥2OD)
  ·目的基因引物序列;
  ·相對定量實驗報告。

服務(wù)說明
  ·客戶提供基因序列。
  ·以上報價是針對Human、Mouse、Rat三個生物物種采用染料嵌合熒光法的報價。如果是此三種生物物種以外的物種,具體價格請垂詢。
  ·以上報價是以提取的核酸(DNAcDNA)為起始材料設(shè)定的,如果需要進行核酸純化,費用另計。
  ·如因?qū)嶒灢牧系确潜竟驹蛟斐赡硨嶒灢襟E失敗,使實驗提前終止,已啟動的實驗項目仍正常收費。
  ·公司還提供絕對定量服務(wù),客戶需提供標(biāo)準(zhǔn)品,若需制備標(biāo)準(zhǔn)品,費用另計。

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